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      KlenTaq-S 測(cè)序酶

      簡(jiǎn)要描述:KlenTaq-S 測(cè)序酶是Taq DNA 聚合酶的改造版,為 Taq DNA 聚合酶的大片段,并做了基因突變。本酶具有 5’→3’聚合酶活性,無(wú)5’→3’外切酶活性和 3’→5’外切酶活性。

      • 產(chǎn)品型號(hào):
      • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
      • 更新時(shí)間:2023-10-27
      • 訪  問(wèn)  量:3598

      詳細(xì)介紹

      品牌BIOHUB供貨周期一個(gè)月
      應(yīng)用領(lǐng)域生物產(chǎn)業(yè)

      產(chǎn)品詳情KlenTaq-S 測(cè)序酶是Taq DNA 聚合酶的改造版,為 Taq DNA 聚合酶的大片段,并做了基因突變。本酶具有 5’→3’聚合酶活性,無(wú)5’→3’外切酶活性和 3’→5’外切酶活性。相比普通Taq DNA 聚合酶,KlenTaq-S 測(cè)序酶具有很強(qiáng)的 ddNTP 的滲入能力,因此其適用于終止法 DNA 測(cè)序或焦磷酸解反應(yīng) SNP 分析。

      本公司 KlenTaq-S 測(cè)序酶是重組表達(dá),并經(jīng)多步純化制備的重組蛋白。

      活性定義活性單位指在 72℃下, 1×AM PCR Buffer 1,30 min 內(nèi)將 10 nmole dNTP 摻入酸不溶性物質(zhì)所需的酶量。特點(diǎn)

      1.尤其適合 ddNTP 等修飾核苷酸的摻入反應(yīng)

      2.相比全長(zhǎng) Taq DNA 聚合酶,本酶比活性有所降低

      適用范圍

      ddNTP 終止法DNA 測(cè)序(一代測(cè)序

      焦磷酸解反應(yīng)延伸法 SNP 分析

      質(zhì)量控制

      經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)控檢測(cè),確保該產(chǎn)品具有最高的活性和純度。

      酶貯存緩沖液

      20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.5% Nonidet P40, 0.5%Tween20, and 50% glycerol.

      應(yīng)用舉例

      以下反應(yīng)舉例為 50 μl 標(biāo)準(zhǔn) PCR 體系,僅供參考。實(shí)際 PCR 條件應(yīng)根據(jù)模板、引物、目的片段大小加以?xún)?yōu)化,確定最佳反應(yīng)條件。

      1) 按下表配制反應(yīng)體系

      組份 

      體積/μl

      終濃度 

      10×AM PCR Buffer 1

      5

      dNTPs2.0 mM

      5

      0.2 mM

      引物 F10 μM

      1.5

      0.3 μM

      引物R10 μM

      1.5

      0.3 μM

      Template

      Varable*

      /

      KlenTaq-S測(cè)序酶(5U/μl

      0.5

      2.5U

      ddH2O

      Varable

      /

      總體積

      50

      /

      *模板DNA用量參數(shù)(50 μl反應(yīng)體系):

      人基因組DNA100-1000 ng ; 微生物基因組DNA 10-100ng;PCR產(chǎn)物 1 ng-10 ng; Plasmid DNA 5-30 ng ; cDNA from RT reaction 1-5 μl 。

       

      2) 按如下條件進(jìn)行反應(yīng),

      95

      2-5 min


      95

      15 sec

       

      25-35 Cycles

      55~72

      20 sec

      72

      1kb/min

      72

      5 min


      3) 瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)PCR 產(chǎn)物,或按實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪M(jìn)行后續(xù)操作。

      注意事項(xiàng)1.PCR 條件和野生型 Taq DNA 聚合酶類(lèi)似,對(duì)特定 DNA 的測(cè)序反應(yīng)可能需要優(yōu)化。2.本酶擴(kuò)增能力較野生型 Taq DNA 聚合酶有所降低,PCR 產(chǎn)量有所降低,不建議用于常規(guī) PCR。3.不可用于 Taqman 探針?lè)?/span> q-PCR。 濃度5U/uL運(yùn)輸與保存

      -20℃可保存 年,避免反復(fù)凍融


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